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Th17细胞在乙型肝炎病毒相关性肝病中的表达及意义
作者:未知 如您是作者,请告知我们
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  [摘要] 目的 分析Th17细胞在乙型肝炎病毒相关性肝病中的表达及意义。 方法 随机抽取该院自2012年11月—2014年12月收治的55例慢性乙型肝炎、55例相关性肝硬化患者及抽取同时段内来该院实施健康体检的受检者55名作为研究对象;将前者作为观察1组、观察2组,后者作为对照组,针对所有研究对象,均实施相对应的检查,分析血浆IL-17水平、外周血Th17细胞频率。结果 血浆IL-17水平、外周血Th17细胞频率观察1组(21.73±4.66)pg/mL、(2.16±0.40)%、观察2组(32.52±9.58)pg/mL、(2.19±0.33)%明显高于对照组(11.75±3.3)pg/mL、(1.10±0.25)%,差异有统计学意义(P<0.05),且血浆IL-17水平、外周血Th17细胞频率呈正相关性;观察2组患者中肝脏中的α-平滑肌肌动蛋白水平、IL-17mRNA表达水平明显高于对照组,故α-平滑肌肌动蛋白水平与纤维分化期、肝脏炎症水平呈正相关性,(r=0.430、0.660、0.601、0.506,P<0.05)。 结论 Th17细胞在乙型肝炎病毒相关性肝病中发生与发展中发挥着作用。 
  [关键词] Th17细胞;乙型肝炎病毒;相关性肝病 
  [中图分类号] R512 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742(2018)11(a)-0030-03 
  [Abstract] Objective To analyze the expression and significance of Th17 cells in hepatitis B virus-associated liver disease. Methods A total of 55 patients with chronic hepatitis B and 55 patients with related cirrhosis who were admitted to the hospital from November 2012 to December 2014 were enrolled. The subjects were treated as the observation group 1 and the observation group 2, and the latter as the control group. The corresponding examinations were performed for all the subjects, and the plasma IL-17 level and the peripheral blood Th17 cell frequency were analyzed. Results Plasma IL-17 levels and peripheral blood Th17 cell frequency were observed in 1 group (21.73±4.66) pg/mL, (2.16±0.40)%, and observation group 2 (32.52±9.58) pg/mL, (2.19±0.33)%, significantly higher than the control group (11.75±3.3) pg/mL, (1.10±0.25)%,the different was statistically significant(P<0.05), and plasma IL-17 level, peripheral blood Th17 cell frequency was positively correlated; observation group 2 of patients in the liver α - the levels of smooth muscle actin and IL-17 mRNA were significantly higher than those in the control group, so α-smooth muscle actin level was positively correlated with fibrosis stage and liver inflammation level(r=0.430, 0.660, 0.601, 0.506,P<0.05). Conclusion Th17 cells play a role in the occurrence and development of hepatitis B virus-associated liver disease. 
  [Key words] Th17 cells; Hepatitis B virus; Related liver diseases 
  臨床研究表明,细胞介导免疫反应在乙型肝炎病毒感染中发挥着重要作用,特别是病毒特异性的T淋巴细胞反应中,其是控制乙型肝炎病毒感染的关键。而Th17细胞作为T淋巴细胞中的新成员,其以维甲酸相关的孤儿受体γt为特异性转录调节因子而存在,以分泌IL-17、IL-21、IL-22等而命名[1]。该次研究随机选取该院2012年11月—2014年12月收治的55例慢性乙型肝炎、55例相关性肝硬化患者及55名健康体检者为研究对象,分析Th17细胞在乙型肝炎病毒相关性肝病中的表达及意义,现报道如下。 
  1 资料与方法 
  1.1 一般资料 
  随机取该院收治的55例慢性乙型肝炎、55例相关性肝硬化患者及抽取同时段内来该院实施健康体检的受检者55名作为研究对象;将前者作为观察1组、观察2组,后者作为对照组。观察1组男39例、女16例,年龄19~72岁,平均(45.5±10.7)岁。观察2组男36例、女19例,年龄20~71岁,平均(45.0±11.2)岁。对照组男37名,女18名,年龄20~72岁,平均(46.0±10.5)岁。对比分析3组研究对象基线资料,差异无统计学意义(P>0.05)。经该院伦理委员会批准,患者或家属知情同意。
  1.2 方法 
  流式细胞术检测方法:抽取患者清晨空腹静脉血3 mL,将其置入肝素抗凝真空采血管中,取300 μL全血,加入50 ng/mL十四烷酸PMA、0.7 μg/mL莫能霉素(型号BJ-0015-2016)、1 μg/mL离子霉素(美国生产、I-6800-5 mga),进行培养箱孵育5 h,24 h内检测外周血Th17细胞频率。 
  酶联免疫吸咐法检测方法:血液离心处离后,取离心血浆,将其保存于零下80℃的冰箱内,通过ELISA检测IL-17水平。 
  荧光定量法检测IL-17mRNA表达情况:取健康研究对象及乙型肝炎病毒患者的肝组织,将其放置于液痰中转移,并保存于-80℃的冰箱内备用,应用逆转录试剂合成cD-NA,待其迅速冰浴后。实施荧光定量PCR,扩增IL-17mRNA[2-3]。 
  取新鲜肝组织后,将其固定于甲醛溶液中,24 h内将其制作成蜡块,对蜡块连续切片后,进行常规HE染色,在光学显微镜下观察,α-平滑肌肌动蛋白表达情况采用免疫组织化学染色法检测。 
  1.3 分析指标 
  分析3组研究对象血浆IL-17水平、外周血Th17细胞频率、α-平滑肌肌动蛋白水平、IL-17mRNA表达水平,并对Th17细胞在乙型肝炎病毒相关性肝病中的表达及意义进行分析。 
  1.4 统计方法 
  采用SPSS 22.0统计学软件分析数据,计量资料采用(x±s)表示,行t检验,计量资料采用n(%)表示,行χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。 
  2 结果 
  2.1 3组血浆IL-17水平、外周血Th17细胞频率、IL-17mRNA表达水平 
  观察1组、观察2组血浆IL-17水平、外周血Th17细胞频率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),见表1。 
  2.2 血清学指标、外周血Th17细胞频率相关性分析 
  分析观察1组、观察2组患者的血浆IL-17与外周血Th17细胞频率发现,以上两个指标呈正相关性,差异有统计学意义(P<0.05),见表2。 
  3 讨论 
  乙型肝炎病毒感染在临床疾病治疗上较为常见,随着病情发展,会引起乙型肝炎病毒相关性肝病,如慢性乙型肝炎、相关性肝硬化[4]。临床研究表明[5],乙型肝炎病毒引起的肝脏损伤与转归情况,与患者机体细胞免疫功能下降、免疫耐受有着密切关系。而淋巴细胞是免疫应答的重要组成部分,其在免疫调节中占据重要作用。目前Th17是临床新发现的一个细胞亚群,其特征为大量分泌IL-17,故Th17在肝脏疾病的发生与发展过程中发挥着重要作用。 
  Th17细胞会分泌IL-17、IL-21、细胞肿瘤因子等,以上因子会聚集在炎症部位,增加炎症反应,从而加重患者病情。同时IL-17还会引发其它炎细胞因子的出现,增加对组织的损伤程度。在肝脏组织中,通过对Th17、IL-17、IL-17mRNA表达水平的检测发现,在乙型肝炎病毒相关性肝病患者中,以上指标的表达水平,明显要高于健康人群,且Th17与血清学指标呈正相关性[6]。此外,肝纤维化是一种修复过程,临床特征为ECM的过度沉淀与异常增生,当肝纤维处于晚期阶段时,HCS会发挥中心作用,而α-平滑肌肌动蛋白水平又是HCS的标志物,故当肝硬化患者α-平滑肌肌动蛋白水平升高时,患者体内有肝脏炎症与纤维化程度均较高,说明患者肝脏炎症较高且肝脏损伤较严重。由此推断,Th17细胞会参与HCS的激活过程[7]。该次研究显示:血浆IL-17水平、外周血Th17细胞频率观察1组[(21.73±4.66)pg/mL、(2.16±0.40)%]、观察2组[(32.52±9.58)pg/mL、(2.19±0.33)%]明显高于对照组[(11.75±3.3)pg/mL、(1.10±0.25)%](P<0.05)。是由此,Th17是最重要的效应因子,其在患者体内表达广泛,不仅是重要的促炎因子,还可诱导其它炎细胞因子等进行表达,从而加重炎症细胞的浸润及对组织损伤。该次研究血浆IL-17水平、外周血Th17细胞频率。其与陈梅等人[8]研究结果相似,即相关性肝硬化患者血浆IL-17水平、外周血Th17细胞频率分别为(32.51±9.57)pg/mL、(2.18±0.34)%[8]。 
  綜上所述,在乙型肝炎病毒相关性肝病的发生与发展过程中,Th17细胞起着重要作用,值得推广。 
  [参考文献] 
  [1] 姚思敏,刘映霞,李晓鹤,等.慢性乙型肝炎患者外周血Th17细胞及相关转录因子表达的检测[J].中华实验和临床病毒学杂志,2015,29(1):2-4. 
  [2] 李成伟,卢丹,那妍,等.恩替卡韦治疗后e抗原阳性慢性乙型肝炎患者Treg/Th17比率的变化及其与疗效的关系[J].中国医科大学学报,2017,46(1):33-35,40. 
  [3] 栗军香,王银茹,李阿静,等.Treg/TH17细胞因子的平衡作用与不同中医症候HBV宫内感染相关性研究[J].海南医学,2016,27(21):3448-3451. 
  [4] 刘娇, 王川林,古雪,等.Th17/Treg细胞失衡与乙肝病毒感染相关性肝病的关系[J].川北医学院学报,2017,32(3):479-482. 
  [5] 陈端.拉米夫定在慢性乙型肝炎患儿外周血Th17细胞变化的研究[J].检验医学与临床,2016,13(9):1220-1221. 
  [6] 袁睿,韦嘉.IL-17/Th17细胞在感染性疾病中的作用研究进展[J].医学综述,2013,19(13):2322-2324. 
  [7] 申红玉,杭双熊,钱梅云,等.抗病毒治疗对慢性乙型肝炎患者外周血中Th17细胞及其相关细胞因子的影响[J].实用医学杂志,2016,32(9):1425-1427. 
  [8] 陈梅,郭晓云,姜海行,等.Th17细胞在乙型肝炎病毒相关性肝病中的表达及意义[J].重庆医学,2016,45(5):592-594,59 


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